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今天百螢給大家?guī)Я说氖墙?jīng)典熒光染料中香豆素的介紹及推薦。哪種香豆素產(chǎn)品使用范圍*廣?與其他經(jīng)典熒光染料相比,香豆素有什么優(yōu)勢?希望通過百螢此次的推薦,可以讓大家對香豆素有一個新的了解。
香豆素及其衍生物
香豆素和香豆素衍生物是紫外線可激發(fā)的藍(lán)色熒光染料,其短發(fā)射波長在?390至?480 nm范圍內(nèi)。用途*廣泛的香豆素包括AMCA、7-氨基香豆素(AFC和AMC)、7-羥基香豆素和7-甲氧基香豆素的衍生物, 它們用于制備藍(lán)色熒光肽、蛋白質(zhì)和其他生物分子。與熒光素, 羅丹明和花青相比,香豆素由于其相對較低的消光系數(shù)而產(chǎn)生中等亮度的熒光,光穩(wěn)定性比較穩(wěn)定。藍(lán)光探針*適合用于細(xì)胞靶標(biāo)等高豐度靶標(biāo)的直接成像、細(xì)胞追蹤應(yīng)用、檢測酶活性的底物以及某些多色熒光應(yīng)用-包括**熒光、核酸和蛋白質(zhì)微陣列、原位雜交和神經(jīng)元追蹤等。
光譜性質(zhì)
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圖1: AMCA(一種常用的香豆素衍生物)的激發(fā)和發(fā)射光譜。 |
AMCA和Alexa Fluor® 350的*佳替代品iFluor 350
iFluor 350染料是一種與AMCA光譜相似的亮藍(lán)色熒光染料,具有比香豆素更優(yōu)良的水溶性、光穩(wěn)定性以及更高的熒光量子產(chǎn)率。iFluor 350綴合物非常適合直接對高豐度靶標(biāo)成像,在多色應(yīng)用(例如流式細(xì)胞儀和超分辨率熒光顯微鏡)中特別適用,而不會影響綠色和紅色熒光探針的性能。圖2.將 HeLa細(xì)胞固定在4%甲醛中,然后用iFluor 350鬼筆環(huán)肽染色。
表1.iFluor 350與AMCA光譜比較
熒光產(chǎn)品 | 量子產(chǎn)率 | 消光系數(shù) | 亮度 |
iFluor 350 | 0.95 | 20,000 | ** |
AMCA | 0.53 | 19,000 | * |
香豆素產(chǎn)品類型
我們提供多種香豆素產(chǎn)品,包括用于標(biāo)記肽、蛋白質(zhì)和其他生物分子的活性染料、綴合物、以及用于檢測細(xì)胞、勻漿和溶液中酶活性的底物。
香豆素活性染料
選擇一種染料標(biāo)記化學(xué)試劑以修飾以下反應(yīng)基團(tuán):
胺 | 硫醇 | 羧基,羰基和點(diǎn)擊化學(xué) |
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酶底物
選擇一種酶底物,以檢測酶促活性:
半胱天冬酶 | 蛋白酶 | 肽酶 | 磷酸酶 |
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綴合物
選擇一種香豆素綴合物進(jìn)行凋亡檢測、細(xì)胞器標(biāo)記:
二級抗體綴合物 | F-肌動蛋白標(biāo)記 | 凋亡檢測 |
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